實(shí)時(shí)熒光定量PCR實(shí)驗時(shí)的注意事項

實(shí)時(shí)熒光定量PCR實(shí)驗需要先制備混合反應液，大劑量包裝的反應試劑，使用前進(jìn)行分裝，盡量減少試劑的反復凍融。建議所有樣本要有三個(gè)重復。實(shí)驗操作過(guò)程時(shí)需注意以下幾點(diǎn)，有利于避免實(shí)驗污染問(wèn)題。1.用稀釋的漂白劑或凈化劑擦拭凈化臺。2.在的配有紫外燈超凈式或者超靜臺中準備樣品，理想的是樣品的準備與PCR的擴增分開(kāi)在不同的區域完成。3.在樣品制備和配制反應過(guò)程中要勤換手頭。4.勤用稀釋的漂白劑擦拭移液器。5.只使用PCR級的水和PCR試劑進(jìn)行PCR實(shí)驗。5. 用帶旋蓋的 EP 管稀釋和配制反應液。6. 在進(jìn)行 PCR 實(shí)驗時(shí)，還應準備一個(gè)無(wú)模板的對照來(lái)驗證有無(wú)污染發(fā)生，而且用熱啟動(dòng)酶防止反應開(kāi)始之前的非特異性擴增。在選擇適合做熒光定量PCR試劑凍干的凍干機時(shí)，,要具有完整的PAT控制技術(shù)，可對凍干過(guò)程進(jìn)行完整的控制和分析監控。包括預凍全過(guò)程控制、預凍結束判定、升華全過(guò)程控制、升華結束判定、解析全過(guò)程控制及凍干結束判定。板層溫度均一度±1℃。系統極限真空度±1Pa。系統真空泄露率＜3Pa.L/S。外界干擾熱量屏蔽。共晶點(diǎn)測試儀助力工藝開(kāi)發(fā)。全進(jìn)口配件。建議提高熒光PCR凍干的相關(guān)性。